助力结直肠癌精准诊疗睿昂基因出席默克“规范化结直肠癌精准检测之路”启动仪

日前，以精准为盟，实践相伴为主题的默克大肠癌精准联盟第二届峰会在上海召开作为默克精准联盟的成员，睿昂基因董事长熊辉和其他同事一起启动了结直肠癌标准化精准检测仪式

睿昂基因创始人熊辉博士出席了仪式。

睿昂基因R&D负责人柯忠和表示，分子标记检测有助于大肠癌的精细化管理目前，结直肠癌指南中强烈推荐以下三种分子标记:RAS突变，BRAF突变，微卫星不稳定性MSI和DNA错配，以修复MMR缺陷其中，RAS和BRAF参与EFGR信号转导通路，两者的突变都会导致EGFR单克隆抗体治疗的失败可是，微卫星不稳定性MSI和DNA错配修复MMR缺陷，将导致肿瘤细胞抗原性的增强，从而对免疫检查点抑制剂治疗产生更好的效果因此，这些分子标志物的检测对于结直肠癌的精确治疗非常重要

柯忠和指出，目前临床上可以通过IHC，FISH，第一代测序等检测技术检测出新诊断的大肠癌患者但对于组织样本获取困难或突变率不高的患者，迫切需要一种更好的检测技术ddPCR检测可以弥补这一不足，尤其是基于游离DNA样本的检测，可以提前监测患者的耐药性和复发情况，为后续临床治疗方案提供指导，帮助患者获益如何尽快实现这些符合临床需求的检测技术，需要临床和药企共同推进，以伴侣诊断试剂盒的形式参与药企的靶向药物临床试验，走一条创新的渠道，让药物和伴侣诊断都尽快转化，最终尽快惠及患者

根据全国综合肿瘤网中国临床肿瘤学会的指南，MSI/MMR，RAS和BRAF是大肠癌中常见的三种基因，建议在诊断大肠癌时检测MSI/MRR基因突变，在诊断转移性或复发性大肠癌时检测RAS和BRAF基因突变KRAS基因是公认的癌基因，其突变与酪氨酸激酶抑制剂等靶向药物的原发耐药性有关临床上，靶向药物如西妥昔单抗注射液对野生型KRAS患者表现出良好的治疗效果，但对KRAS基因突变患者无效同时，NRAS基因的突变可能会降低西妥昔单抗注射液的药效研究表明，BRAF基因突变也与结直肠癌的靶向耐药性有关一般认为BRAF基因突变的患者靶向药物效果差，BRAF突变与患者预后密切相关此外，NCCN指南指出，动态监测循环肿瘤DNA有助于大肠癌术后复发和转移的早期预警

据介绍，睿昂基因以微滴数字PCR检测平台为主导，研发的KRAS，NRAS，BRAF基因突变检测试剂盒可准确检测组织和外周血游离DNA样本中突变频率为0.1%的基因突变该试剂盒由KRAS G12/13反应液，Krasg61反应液，NRAS G12/13反应液，NRAS Q61反应液，BRAF V600反应液和ddPCR MIX3组成KRAS G12/13反应溶液，Krasg61反应溶液，NRAS G12/13反应溶液，NRAS Q61反应溶液和BRAF V600反应溶液含有用于检测目标片段的引物和探针DdPCR MIX3含有扩增所需的热启动酶，dNTPs，MgCl2，缓冲液和液滴稳定剂，用于液滴制备后形成热稳定的油包水型液滴，并确保目的片段在液滴中进行PCR扩增通过集成的数字PCR系统，芯片上电脑后，待测样品DNA，引物，探针和ddPCR MIX3的混合物可自动分离成均匀的纳米升级液滴，PCR反应可在每个液滴中独立进行放大后系统自动运行到分析模块进行荧光读取，通过显微光学系统拍摄双色荧光图像，或者液滴依次通过双色光学检测系统利用泊松分布原理计算正负液滴数量和正液滴比例，最终分析软件可以计算出待测目标分子的浓度或拷贝数

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